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Sangre EDTA, Suero, Plasma.
Conservar las muestras en temperaturas entre 4-8 º C aproximadamente con geles refrigerantes o hielo de nevera.
Extracción de ARN de la muestra mediante estuches comerciales.RT-PCR anidado usando cebadores obtenidos de la región no codificante 5´NCR del virus de la Hepatitis C, tanto la primera como la segunda amplificación utiliza dos primeros tipo específicos, que a su vez ayudan a obtener una alta sensibilidad en el ensayo según McOmish et al 1994, y su visualización de en gel de agarosa con coloración por bromuro de etidio.El producto de la RT-PCR es utilizado para la posterior tipificación usando enzimas de restricción, con las cuales es posible identificar infección por más de un genotipo y distinguir los principales genotipos y subtipos del HCV como: 1a, 1b, 2a, 2b, 3a, 3b, 4, 5 y 6.Controles positivos: Sueros de pacientes ARN VHC positivos y con carga viral conocida.
07 días hábiles.
RESULTADOS: GENOTIPO PARA VIRUS DE HEPATITIS C NO DETECTADORESULTADOS: GENOTIPO PARA VIRUS DE HEPATITIS C: 1aRESULTADOS: GENOTIPO PARA VIRUS DE HEPATITIS C: MIXTO 1a Y 1bRESULTADOS: GENOTIPO PARA VIRUS DE HEPATITIS C: 1bRESULTADOS: GENOTIPO PARA VIRUS DE HEPATITIS C: 2aRESULTADOS: GENOTIPO PARA VIRUS DE HEPATITIS C: 2bRESULTADOS: GENOTIPO PARA VIRUS DE HEPATITIS C: 3a
El ensayo ha sido validado por Laboratorio Genomik CA con controles positivos y negativos comerciales; sin embargo un resultado negativo no excluye la presencia de Genotipo de VHC por debajo del límite de sensibilidad del ensayo, ni la posible presencia de inhibidores de la reacción de PCR.
La hepatitis C es una enfermedad del hígado causada por infección con el virus hepatitis C (HCV), que se encuentra en la sangre de las personas que tienen esta enfermedad. Un 15% de los pacientes con infección aguda, no presentan alteraciones de las enzimas hepáticas, ni ARN perceptible del HCV y sin síntomas clínicos.Los estudios de genotipaje han conducido a la identificación de 6 tipos comunes de HCV y de muchos más subtipos dependiendo del sistema de clasificación. Algunos estudios han podido correlacionar estos tipos con clínica, se sabe que el genotipo 1b es el peor respondedor con un nivel de viremia muy alto y enfermedad hepática más severa o a la hepatitis crónica, mientras que 2a, 2b y 3a tienen un mejor pronóstico. Los estudios recientes han documentado la utilidad de identificar infecciones del tipo 2 y 3 puesto que esos pacientes pueden ser tratados con regímenes terapéuticos más cortos comparados a la infección con otros tipos de HCV. Además de determinar pronóstico de la enfermedad y la probabilidad de la respuesta terapéutica, el genotipaje de HCV es de gran utilidad para identificar la fuente de la infección, particularmente para los subtipos geográficamente distintos.
Davidson F1, Simmonds P, Ferguson JC, Jarvis LM, Dow BC, Follett EA, Seed CR, Krusius T, Lin C, Medgyesi GA, et al. Survey of major genotypes and subtypes of hepatitis C virus using RFLP of sequences amplified from the 5′ non-coding region. J Gen Virol. 1995 May;76 ( Pt 5):1197-204.
