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Biopsia frescas, Suero, Sangre EDTA, LCR.
Conservar las muestras en temperaturas entre 4-8 º C aproximadamente. Las Biopsias frescas, conservar a -20º C inmediatamente o a 4º C en buffer lisis suministrado por el laboratorio con geles refrigerantes o hielo de nevera. NO SE ACEPTAN MUESTRAS EN FORMOL.
Extracción de ADN de la muestra mediante estuches comerciales. PCR sencillo usando cebadores seleccionados de la secuencia de genes de la proteína de membrana de Brucellas spp, según Baily, et al 1992, y su visualización en gel de agarosa con coloración por bromuro de etidio.Control positivo: cepa Brucella abortus.
02 días hábiles.
Positivo: La muestra analizada es PositivaNegativo: La muestra analizada es Negativa
El ensayo ha sido validado por Laboratorio Genomik CA con controles positivos y negativos comerciales; sin embargo un resultado negativo no excluye la presencia de ADN de Brucella por debajo del límite de sensibilidad del ensayo, ni la posible presencia de inhibidores de la reacción de PCR.
La Brucelosis es el conjunto de enfermedades ocasionadas, tanto en el hombre como en los animales (zoonosis) por microorganismos del género Brucella. Son bacilos gramnegativos pequeños, inmóviles y aerobios, de crecimiento lento. Se conocen tres especies clásicas responsables de la brucelosis humana: Brucella melitensis, Brucella abortus, Brucella suis. Las tres especies menores (Brucella neotomae, Brucella ovis y Brucella canis), no revisten importancia en patología humana. La brucelosis puede ser asintomático o presentar un espectro de signos y síntomas los cuales van desde fiebre de inicio agudo, sudoración profusa, algias de localización articular (sin artritis) muscular o neurológicas, lo cual define la Brucelosis aguda típica, hasta sintomatología focalizada como orquiepididimitis, sacroileitis, espondilitis e incluso bursitis, tenosinovitis, granulomatosis hepática y neumonía brucelar. Las complicaciones más graves de la brucelosis incluyen endocarditis y desorden del SNC. Pueden ocurrir recidivas de la enfermedad en casos con o sin tratamiento o durante los tres primeros meses, hay pacientes que progresan a Brucelosis crónica, con artralgia, parestesia, alteraciones músculo-esqueléticas y neurovegetativas.
Casanas MC, Queipo-Ortuno MI, Rodriguez-Torres A, Orduna A, Colmenero JD, Morata P. Specificity of a polymerase chain reaction assay of a target sequence on the 31-kilodalton Brucella antigen DNA used to diagnose human brucellosis.2001. Eur J Clin Microbiol.Infect.Dis;20(2):127-31.Baily GG, Krahn JB, Drasar BS, Stoker NG.Detection of Brucella melitensis and Brucella abortus by DNA amplification. J Trop Med Hyg. 1992 Aug;95(4):271-5.
