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EPSTEIN BARR / Carga Viral

Categoría: Enfermedades Infecciosas.
Días hábiles de entrega: 7
 

3 ml Sangre venosa EDTA tubo tapa Morada

Conservar y enviar las muestras en temperaturas entre 4-8 º C aproximadamente; para él envió se pueden usar geles refrigerantes o hielo de nevera.

Extracción de ADN de la muestra mediante estuches comerciales. PCR en Tiempo Real usando Epstein Barr Virus Fluorescent Polymerase Chain Reaction Diagnostic Kit DAAN DIAGNOSTICS. Para la cuantificación se construye una curva patrón partiendo de la Preparación de EBV positiva de referencia (1.0x107UI/ml - 1.0x104UI/ml) suministrado en el kit. La amplificación de ADN de EBV en la muestra analizada es detectada como un incremento de la fluorescencia. La técnica se realiza en un Termociclador DA-7600 (DaAn Gene Co.) Control positivo: Control Positivo suministrado por el kit de diagnóstico.

08 días hábiles.

Negativo: No se detecta amplificación de ADN EPSTEIN BARR LOG: --

Positivo: Detección de ADN EPSTEIN BARR Copias/ml, LOG: x

Límite de detección 5000 Copias/ml. Se recomienda que los valores absolutos de carga viral obtenidos mediante procedimientos de amplificación genómica se interpreten como cualquier valor comprendido dentro de un intervalo de 0.5 log (+/- 300 veces) del valor obtenido.

Recientemente, se ha propuesto que el monitoreo frecuente de la carga de ADN del VEB por PCR en tiempo real (PCR-TR) puede utilizarse como un marcador temprano para poder decidir el tratamiento en casos de infección activa, especialmente cuando se sospecha el curso rápido de una ELP-VEB. Algunos reportes de casos han mostrado que, en ocasiones, los niveles de ADN VEB no alcanzan valores significativos a pesar de la existencia de enfermedad activa, por lo que siempre debe hacerse una estrecha evaluación en función de la condición clínica.7-9 Además de los problemas de interpretación de los resultados de estudios de PCR-TR relacionado al momento clínico de la infección del paciente, se agregan diferentes contratiempos que deben enfrentarse en los laboratorios, con respecto a los procedimientos de realización del estudio. Existe variabilidad en los resultados cuando se han evaluado pruebas de laboratorio ya comercializadas, comparadas con aquéllas realizadas localmente en cada laboratorio (caseras), en ocasiones por algunas diferencias en reactivos utilizados, temperatura de desnaturalización, etc. Lo anterior obliga a los laboratorios a verificar la reproducibilidad de los ensayos, con evaluaciones inter-ensayo e intraensayos, con controles estrictos de las diferentes variables y siguiendo los protocolos establecidos por los laboratorios productores de los equipos.

Importante:Forma parte del Multiplex III (Meningitis Viral) junto con Enterovirus spp, Virus Epstein barr, Virus Herpes simple 1&2, Virus Herpes humano 6, Virus varicela zoster, o el Multiplex VIII (Multiplex de Herpes Virus)

Recientemente, se ha propuesto que el monitoreo frecuente de la carga de ADN del VEB por PCR en tiempo real (PCR-TR) puede utilizarse como un marcador temprano para poder decidir el tratamiento en casos de infección activa, especialmente cuando se sospecha el curso rápido de una ELP-VEB. Algunos reportes de casos han mostrado que, en ocasiones, los niveles de ADN VEB no alcanzan valores significativos a pesar de la existencia de enfermedad activa, por lo que siempre debe hacerse una estrecha evaluación en función de la condición clínica.7-9 Además de los problemas de interpretación de los resultados de estudios de PCR-TR relacionado al momento clínico de la infección del paciente, se agregan diferentes contratiempos que deben enfrentarse en los laboratorios, con respecto a los procedimientos de realización del estudio. Existe variabilidad en los resultados cuando se han evaluado pruebas de laboratorio ya comercializadas, comparadas con aquéllas realizadas localmente en cada laboratorio (caseras), en ocasiones por algunas diferencias en reactivos utilizados, temperatura de desnaturalización, etc. Lo anterior obliga a los laboratorios a verificar la reproducibilidad de los ensayos, con evaluaciones inter-ensayo e intraensayos, con controles estrictos de las diferentes variables y siguiendo los protocolos establecidos por los laboratorios productores de los equipos.

Epstein Barr Fluorescent Polymerase Chain Reaction Diagnostic Kit. http://www.daangene.com.

Watzinger F, Suda M, Preuner S, Baumgartinger R, Ebner K, Baskova L, et al. Real-time quantitative PCR assays for detection and monitoring of pathogenic human viruses in immunosuppressed pediatric patients. J Clin Microbiol 2004;42:5189-5198



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